分子间相互作用分析仪通过监测分子间相互作用过程中的物理性质变化(如质量、折射率、频率等),实现无标记、实时、动态的相互作用分析。主要技术包括:
1、表面等离子共振技术(SPR)
原理:利用金属薄膜表面折射率变化引起共振角偏移,推断分子结合情况。
特点:实时观测结合/解离过程,提供动力学(结合/解离速率)和亲和力(平衡解离常数)数据,被誉为分子互作检测的“金标准”。
2、生物膜干涉技术(BLI)
原理:通过光在生物膜层干涉信号的变化检测分子结合。
特点:无流路设计、高通量、灵敏度高,适合小分子检测。
3、微量热泳动技术(MST)
原理:通过检测分子热泳动速度变化分析相互作用。
特点:样品消耗低、检测速度快,适用于复杂溶液环境。
特点:
无需标记:许多分子间相互作用分析仪无需对样品分子进行标记,可保持生物分子的天然活性,避免标记对分子相互作用的影响。
实时监测:能实时监测分子间的结合、解离过程,提供动态的相互作用信息,如结合速率常数、解离速率常数等。
高通量:部分仪器可支持 96 孔板和 384 孔板,能同时平行检测多个样品,提高检测效率。
可兼容粗制样品:一些仪器可以在粗制、未纯化的混合物,如细胞裂解液或杂交瘤上清液中测量分析物,减少了样品预处理的步骤。