蛋白纯化仪是一种用于分离和纯化蛋白质等生物分子的仪器,主要基于层析技术原理,利用不同蛋白质在固定相和流动相之间分配系数的差异,通过选择合适的纯化填料,如凝胶过滤层析填料、离子交换层析填料、疏水层析填料和亲和层析填料等,在液体流动动力的作用下,使蛋白质混合物在层析柱中进行分离。
蛋白纯化仪的操作要点与维护规范:
1、操作前准备:
环境检查:确保仪器放置平稳,远离振动源和高温环境。
缓冲液处理:所有缓冲液需用0.45 μm滤膜过滤,并超声脱气10分钟,避免气泡干扰泵运行。
样品预处理:离心或过滤样品,去除颗粒物防止堵塞管路。
2、运行中监控:
压力控制:设置报警阈值,避免柱床塌陷。
流速调节:启动时从低流速逐步升高至目标值。
检测信号:实时观察UV基线稳定性,排查气泡或灯源老化问题;电导率波动可能提示缓冲液混合不均。
3、使用后维护:
管路清洗:依次用纯水(15分钟)→20%乙醇(10分钟)冲洗,防止生物残留。
层析柱保存:按填料要求保存。
传感器维护:每周校正pH电极,清洁UV检测器流通池,必要时更换光源。